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副猪嗜血杆菌与Glasser氏病研究进展

时间:2009-06-06    点击: 次    来源:阳光畜牧网    作者:佚名 - 小 + 大

    5.3 血清定型
    如上所述,副猪嗜血杆菌的血清型已经根据特异性兔抗血清免疫扩散试验的结果,确定了15个血清型(1~15)。最近,还有人对不同的血清学分型方法[免疫扩散试验(ID)、间接血凝试验(IHA)和协同凝集试验(CA)]进行了比较研究(Río等,2003;Tadjine等,2004;Turni和Blackall,2005)。
    Turni和Blakall(2005)比较了ID和IHA检测野毒株的结果后发现,IHA产生比ID更多的不可分型菌株,前者达44%,后者为41%。Del Rio等(2003)和Tadjine等(2004)的研究则认为,最适合副猪嗜血杆菌血清分型的方法应该是IHA,因为IHA减少血清学不可分型的百分数至少比ID或CA低10%。其他学者详细分析了Del Rio和Tadjine等的研究结果后发现,他们的研究方法有缺陷,即所检测的菌株没有一株是国际认可的标准菌株,所采用的抗原提取技术也没有经GD试验校正。因此,他们的研究结果受到质疑。
    分离菌株不可定型的原因,可能是其所含型特异抗原的数量不足,也可能是至今尚未被认知的血清新型。ID和IHA分型结果出现差异的原因,是由于所用的可溶性天然抗原都是用于ID的。因为,IHA试验是用可溶性抗原包被红血细胞,其结果是把沉淀抗原当凝集抗原使用,从而使IHA试验的敏感性比ID试验提高了3000倍(Mittla,2003)。
    5.4 抗体检测
    补体结合试验(CF)、间接血凝(IHA)试验和ELISA试验都可用于检测副猪嗜血杆菌的抗体。急性病例经过一周的病程即可检出抗体,但都有较明显的型交叉反应性。Takahashi等(2001)作了免疫接种试验,他通过CF试验检测抗体滴度,其结果在二免后19d呈现阳性滴度。研究发现,无论是用超声粉粹的还是用加热煮沸的菌体作包被绵羊红细胞的抗原进行IHA,无论是用煮沸细菌的上清液还是用酚:水热抽提物透析液作抗原进行ELISA,都只能获得不稳定的阴性结果,特别是在检测免疫动物时。因此说,这些试验不宜用于检测免疫保护反应。但是,如果改用福尔马林灭活的全菌体作抗原进行ELISA试验,则可用于研究母猪的抗体滴度和仔猪的疫苗接种反应。
    5.5 分子生物学方法
    这类方法中,一个很有应用前景的方法是寡核苷特异性捕捉平板杂交试验(OSCPH,oligonucleotide-specific capture plate hybridization),其敏感性很高,为102CFU/mL纯培养物。问题是不容易获得纯培养物。因此,又建立了一种能直接鉴定病料中副猪嗜血杆菌的PCR方法,其敏感性亦达102CFU/mL。而且,可以用于检测已灭活的病菌。然而,这两种方法对吲哚放线杆菌都可以呈现弱阳性反应。由此,Oliveira和Pijoan(2004)推荐这两种方法只用于检测呼吸道以外的副猪嗜血杆菌,因为吲哚放线杆菌是上呼吸道中的常在菌。
    5.6免疫组化诊断
    由于杂菌滋长而使副猪嗜血杆菌分离异常艰难,因此有人推荐用免疫组化法(IHC)来诊断副猪嗜血杆菌感染。IHC的优点是,即使副猪嗜血杆菌已被巨噬细胞杀灭而遗骸于胞浆中,也可轻易地被检测到。
    问题是本方法中所使用的多克隆抗体与胸膜肺炎放线杆菌有交叉反应(Segales等,1997)。
    6 治疗和预防
    与其它疾病一样,卫生恶劣、营养不适和管理不当等诱因都可以促进副猪嗜血杆菌感染的发生和流行。特别是无序转群,以及在同一圈内饲养不同年龄的猪只,更是促成本病暴发的诱因。
    6.1 抗菌素治疗
    副猪嗜血杆菌病可以用抗菌素治疗。治疗要求尽早尽快,症状一旦出现即应经胃肠外途径给药。用药剂量因症而异。对于Gl?sser氏病,由于病原进入组织和脑脊液以及侵害关节,用药剂量一定要大。
    用什么抗菌素,应该根据药敏试验结果来选择。有关本菌抗药性的报道不多、瑞士分离到的所有副猪嗜血杆菌菌株对青霉素和恩氟沙星均敏感,对链霉素、卡那霉素、庆大霉素、四环素、红霉素、磺胺嘧啶和TMP+磺胺嘧啶都有抗性(wissing等,2001)。丹麦菌株对所测抗菌药物(氨苄青霉素、头孢替福、环丙沙星、红霉素、氟苯尼考、青霉素、壮观霉素、四环素、硫粘菌素、替米考星、TMP+磺胺甲基异恶唑)都十分敏感(Aarestrup等,2004)。

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