2017—2018年山东省猪口蹄疫免疫效果评估

摘要：为了解山东省猪群口蹄疫免疫状况，评估疫苗免疫效果，2017—2018 年对全省 135 家规模化猪场，随机采集血液并分离血清，通过 ELISA 方法检测猪 O 型口蹄疫抗体和猪口蹄疫结构蛋白 VP1 抗体。结果显示：2017—2018 年，无疫区内的合格率分别为 96.03%、94.80%，其余地区的 O 型抗体合格率分别为 78.24%、81.88%，均达到了农业农村部要求的 70% 以上的标准；聊城和济宁等地区的猪 O 型口蹄疫抗体水平最低，平均阳性率分别为 64.68% 和 63.5%；各类型养殖场中，种猪场合格率最高，分别为 90.73% 和 88.00%，散养户最低，合格率分别为 68.80% 和 66.88%。2017—2018 年，VP1 抗体合格率分别为 87.9%、84.9%，达到了70% 以上的标准。结果表明，山东省猪口蹄疫免疫效果整体较好，说明强制免疫工作达到了预期效果，但散养户和部分地区猪群的免疫水平偏低，需要加强免疫宣传和培训，调整优化免疫程序，加大监测督查力度，实施疫苗的科学免疫，从而全面提高猪群免疫抗体水平。  

关键词：口蹄疫；猪；免疫；抗体水平；VP1；山东

口蹄疫（foot-and-mouth disease，FMD）传播迅速、发病率高，主要感染牛、猪等偶蹄类动物，感染后的典型临床特征为口舌黏膜、蹄部皮肤形成水疱、糜烂或溃疡病灶，可引起幼畜死亡、成年畜生产性能下降，并且严重影响动物及动物产品贸易，被世界动物卫生组织（OIE）列为须通报动物疫病，被我国列为一类动物疫病。近年来，北美洲、大洋洲、欧洲等地区的畜牧业发达国家始终保持无 FMD 状态，仅亚洲和非洲为 FMD 高发区。

我国农业农村部官方网站公布的监测数据显示，自2013 年以来，全国共发生 FMD 疫情 77 起，其中猪疫情 23 起。各类 FMD 疫情中，A 型疫情（Sea-97株为主）呈现明显下降趋势，近 3 年仅零星发生；而 O 型疫情则呈现持续增长趋势，主要由 Mya-98和 PanAsia 株引起，近来又受到 Ind-2001 毒株的严重威胁。强制免疫是我国防控 FMD 等重大动物疫病的主要手段，而免疫效果直接关系到疫病防控成效。因此，开展免疫动物的抗体水平监测，及时了解疫苗的免疫效果，对于动物疫病的有效防控和风险评估尤为重要。FMD 抗体监测是反映本地区猪群免疫状况的重要手段，可为提高猪群免疫力、减少猪群发病风险、调整猪群免疫程序提供重要依据。

目前，山东省大多数猪场免疫 O 型 FMD 灭活疫苗，也有一些猪场开始免疫 VP1 合成肽疫苗。VP1 是一种 FMD 病毒的结构蛋白。VP1 合成肽疫苗无散毒风险，生物安全度高，抗原纯净度好且含量精确稳定，无杂质和不良反应，抗体持续时间长，易区分免疫与感染抗体，因而具有良好的市场前景。为了解山东省猪群的 O 型 FMD免疫状况，评估疫苗免疫效果，2017—2018 年对全省 16 市 135 家猪场进行了 O 型抗体和 VP1 抗体检测，以期为做好全省猪 FMD 防控提供依据。

1　材料与方法

1.1　试验器材

大龙 MicroPette 单道、8道移液器： 型号YE17BAG0100332，购自山东和业生物科技有限公司；96 孔反应板、96 孔全自动洗板机：型号AS-16010-00，购自杭州奥盛仪器有限公司；37 ℃恒温培养箱：型号 1196-82-0，购自科裕孵化设备有限公司；Multiskan Sky 全波长酶标仪：型号51119570，购自赛默飞世尔科技有限公司。

1.2　主要试剂

O 型FMD 抗体液相阻断 ELISA 检测试剂盒：中国农科院兰州兽医研究所生产，批号2017090502；结构蛋白 VP1 单抗阻断 ELISA 抗体检测试剂盒：中牧实业生产，批号 201611003。

1.3　样品采集

免疫 O 型灭活苗的样品采集：春秋季集中免疫后，在全省16个地市，随机挑选市（县、区），采集商品猪场、种猪场和散养户猪群的全血样品。

除无疫区外，其他地市的抽样数量为：每个地市随机抽查 3 个规模养猪场（2个商品猪场和 1 个种猪场），每个规模养殖场至少采集样品20份；随机抽查2~5个散养户，每户采集样品5份。潍坊、青岛、烟台、威海等无疫区，每月随机采集各规模猪场血清，根据抽选猪场存栏数量，每场按 5%~8% 的比例随机采集（春秋集中免疫后或未进行抗体监测的猪场适当加大比例）。

免疫合成肽 VP1 疫苗的样品采集：随机挑选各地市免疫合成肽 VP1 疫苗的猪场，采集猪群全血样品，每场至少采集样品10份。

2017—2018 年，共采集免疫 O 型灭活苗猪血清样品53967份，其中无疫区（潍坊、青岛、烟台、威海）样品 51106 份，其他地市2861 份（表1、表2）；免疫合成肽 VP1 疫苗猪血清样品 888 份。

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