2.1.8 脱脂奶中β-内酰胺酶的测定（未完成，实验参数待验证）
在每个抗生素检测用培养基上平均放置4个牛津杯，在每个杯子中分别加入200ul添加有不同成分的10%脱脂奶（添加成分见表1），37℃培养18-22小时，观察抑菌圈情况。
表1
编号 0.5ug/ml青霉素G 400U/mlβ-内酰胺酶 25ug/ml舒巴坦 结果预测
（是否产生抑菌圈）
1 ＋ － － 有
2 ＋ － ＋ 有
3 ＋ ＋ － 无
4 ＋ ＋ ＋ 有
在每个抗生素检测用培养基上平均放置4个牛津杯，在每个杯子中分别加入200ul添加有不同成分的10%脱脂奶（添加成分见表1），37℃培养18-22小时，观察抑菌圈情况。 2.1.9 β-内酰胺酶检测限的测定（未完成）
在每个抗生素检测用培养基上平均放置4个牛津杯，在每个杯子中分别加入200ul添加有0.5ug/ml青霉素、25ug/ml舒巴坦和不同浓度β-内酰胺酶（0.4U/ml，4U/ml，40U/ml，400U/ml）的10%脱脂奶，37℃培养18-22小时，观察抑菌圈情况。
2.2 牛奶样品中β-内酰胺酶的测定
在每个抗生素检测用培养基上平均放置4个牛津杯，在每个杯子中分别加入200ul添加有不同成分的10%脱脂奶（添加成分见表2），37℃培养18-22小时，观察抑菌圈情况。同时做脱脂奶中β-内酰胺酶的测定。
表2
编号 0.5ug/ml青霉素G 400U/mlβ-内酰胺酶 25ug/ml舒巴坦 抑菌圈 与1号比直径差异 结果预测
1 ＋ － － 有
2 ＋ － ＋ 有 ≥3mm
≤3mm 含β-内酰胺酶
不含β-内酰胺酶
3 ＋ ＋ － 无
4 ＋ ＋ ＋ 有
5 － － ＋ 无
6 － － － 有/无 含抗生素/不含抗生素 3 实验结果与分析
3.1 预实验结果与分析
3.1.1 生鲜牛乳抗生素分解剂活性结果观察与分析
第一次实验 10天后第二次实验 青霉素对照
第一次实验5万U/ml抗生素分解剂部分分解青霉素，与青霉素对照组比较抑菌圈明显变小；50万U/ml抗生素分解剂可以完全分解青霉素，不产生抑菌圈。
10天后第二次实验50万U/ml抗生素分解剂部分分解青霉素，与青霉素对照组比较抑菌圈明显变小。
第一次实验和第二次实验结果比较，抗生素分解剂活性下降至少1个数量级。 3.1.2 青霉素G浓度的选择
0.5IU/ml青霉素产生抑菌圈约为22mm，符合实验要求。 3.1.3 β-内酰胺酶对菌生长的影响
极高浓度β-内酰胺酶不影响菌生长。 3.1.4 β-内酰胺酶对青霉素抑菌效果的影响
第一次实验结果 10天后第二次实验结果
第一次实验中，4U/mlβ-内酰胺酶即可部分分解0.5IU/ml青霉素，与对照组比较抑菌圈明显减小。
10天后第二次实验，200U/mlβ-内酰胺酶可部分分解0.5IU/ml青霉素，与对照组比较抑菌圈明显减小。但4U/mlβ-内酰胺酶组产生的抑菌圈与对照组比较无明显区别。
通过第一次实验和第二次实验结果比较，说明抗生素分解剂活性下降。
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