培养条件和结果对比见表1。 表1 转瓶培养和反应器全悬浮培养BHK21细胞对比 | 项目 | 转瓶培养 | 反应器悬浮培养 | | 培养体积(L) | 1.5 | 500 | | 细胞培养基 | 低血清培养基 | 无血清培养基 | | 血清使用量 | 5% | 0 | | 细胞生长状态 | 贴壁生长 | 全悬浮生长 | | 培养工艺 | 单瓶培养 | 批培养 | | 细胞接种密度(cells/ml)及细胞活率 | 0.25×106 | 0.5×106/96% | | 细胞密度(cells/ml)及细胞活率(48hr) | 2.5 x 106 | 2.5×106/97% | | 细胞密度(cells/ml)及细胞活率(72hr) | 3.5 x 106 | 3.9×106/95% | | 细胞密度(cells/ml)及细胞活率(96hr) | 细胞开始出现脱落 | 5.4×106/94% |

图1 转瓶BHK21细胞低血清培养48hr,100X 
图2 反应器全悬浮无血清培养48hr,100X 结果显示,转瓶培养的BHK21细胞,培养48小时显微镜观察成致密单层,见图1,96小时细胞开始出现脱落死亡;反应器无血清全悬浮培养BHK21细胞48小时的细胞显微镜观察状态如图2,生长至96小时细胞密度可达5.4x106cells/ml,活率维持在94%左右。从细胞数量比较,650L反应器培养一批的细胞数量相当于500~700个15L转瓶培养的细胞总量。
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